抗体纯化介质(GP-ProA)
抗体纯化介质(GP-ProA)
1. 产品简介
抗体纯化介质(GP-ProA)通过偶联的 Protein A 配基特异性地与抗体的 Fc 区结合,经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。抗体纯化介质(GP-ProA) 以超大孔聚甲基丙烯酸酯微球作为基质,以重组 Protein A 为配基, 具有很高的物理化学稳定性,配基不易脱落,寿命长,使用方便,应用广泛。
2. 产品特性
参数 |
指标 |
基质 |
聚甲基丙烯酸酯 |
配基 |
r-Protein A |
平均粒径 |
70 μm±20μm |
动态载量 |
30-40mg IgG/ml wet gel |
最高耐压 |
1 MPa |
pH 稳定性 |
3~ 12(长时间);2~ 13(短时间) |
保存 |
2~ 10 ℃(20%乙醇) |
3. 产品应用
抗体纯化介质(GP-ProA)广泛用于各种抗体的分离纯化。层析操作通常包括装柱、平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。
平衡:用5~ 10CV 的平衡缓冲液(20 mM PB+0. 15M NaCl ,pH 7.0 ,添加适当 浓度的 NaCl 抑制非特异性吸附)平衡层析柱,至流出液电导和 pH 不变(与平衡液一致)。
上样:样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制;低浓度样品溶液可用平衡液透析;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱,样品应经离心或微滤(0.45μm)处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量来确定。
淋洗:上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
洗脱:用洗脱缓冲液(20 mM 乙酸钠,pH 3.0-4.0 或 0. 1M 甘氨酸,pH 3.0)洗 脱,收集流出液。洗脱后,应立刻用碱性缓冲液(如 1M Tris/HCl, pH 9.0)将收集到的抗体溶液中和到中性,维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
再生、原位清洗:介质使用数次(5- 10 次,具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关)后,需要对介质进行再生、原位清洗。
(1) 用 0. 1M 的乙酸或 0. 1M 的乙酸或 20%乙醇淋洗柱子 3-5CV ,然后用缓冲液洗到中性即可重复使用;
(2) 也可用 0.05M NaOH+1M NaCl 或 6M 盐酸胍淋洗柱子 3-5CV ,并用 3~ 10CV 的纯水冲洗,然后用缓冲液洗到中性即可重复使用。
其它注意事项:在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。
4、订购信息
产 品 名 称 |
货号 |
规格 |
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BG18-3110-02 |
50mL |
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BG18-3110-04 |
500mL |
抗体纯化介质(GP-ProA) |
BG18-3110-05 |
1L |
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BG18-3110-07 |
10L |
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BG18-3110-08 |
20L |