BG ProG FF 抗体纯化介质
1、产品简介
BG ProG FF 抗体纯化介质通过偶联的Protein G配基特异性地与抗体的Fc区结合,实现对抗体分子、Fc融合蛋白高选择性吸附,在后续酸性条件下洗脱后,收集到高纯度的目标产品。经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。BG ProG FF 抗体纯化介质以琼脂糖凝胶为基质,以重组Protein G为配基,具有很高的载量,优异的物理化学稳定性,配基不易脱落,寿命长。
2、产品参数
技术指标/型号 |
BG ProG FF 抗体纯化介质 |
平均粒径 |
90 μm±15μm |
基质 |
琼脂糖凝胶微球 |
功能基 |
r-Protein G |
动态载量 |
≥20mg IgG/ml wet resin gel |
最大耐压 |
0.3 MPa |
pH稳定性 |
pH 3-12 |
保存 |
2~10 ℃(20%乙醇) |
3、使用方法
BG ProG FF 抗体纯化介质广泛用于各种抗体的分离纯化。层析操作通常包括装柱、平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。
具体的操作方法如下:
3.1平衡:
用5~10CV的平衡缓冲液(20 mM PB+0.15M NaCl,pH 7.0,添加适当浓度的NaCl抑制非特异性吸附)平衡层析柱,至流出液电导和pH不变(与平衡液一致)。
3.2上样:
样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制;低浓度样品溶液可用平衡液透析;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱,样品应经离心或微滤(0.45μm)处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量来确定。
3.3淋洗:
上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗,直至紫外下降至基线。
3.4洗脱:
用洗脱缓冲液(20 mM乙酸钠,pH 3.0-4.0或0.1M甘氨酸,pH 3.0)洗脱,收集流出液。洗脱后,应立刻用碱性缓冲液(如1M Tris-HCl, pH 9.0)将收集到的抗体溶液中和到中性,避免抗体失活,维持抗体的生物活性。
3.5再生、原位清洗
介质使用数次(5-10次,具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关)后,需要对介质进行再生、在位清洗。
(1)用0.1M的乙酸或20%乙醇淋洗柱子3-5CV,然后用缓冲液洗到中性即可重复使用;
(2)也可用0.05M NaOH+1M NaCl或6M盐酸胍淋洗柱子3-5CV,并用3~10 CV的纯水冲洗,然后用缓冲液洗到中性即可重复使用。
3.6保存:
2-10℃储存于20%乙醇中;层析柱中的介质可用20%的乙醇冲洗后保存于2-10℃。
3.7其它注意事项:
在使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干或密封不严,防止气泡进入。
4、订购信息
BG ProG FF 抗体纯化介质 |
BG16-0010-02 |
50mL |
BG16-0010-04 |
500mL |
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BG16-0010-05 |
1L |
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BG16-0010-07 |
10L |
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BG16-0010-08 |
20L |