AAV亲和层析介质(II型)

 

1、产品简介

     博进生物开发的 AAV 亲和层析介质(II 型) 专为纯化血清型 II型的腺相关病毒(AAV II)而设计的亲和层析介质。AAV亲和层析介质(II 型) 以高交联琼脂糖为基质 ,通过化学偶联纳米抗体为配基 ,该结构使能通过亲和层析法高效、工业规 模地纯化腺相关病毒(AAV)。

 

2、产品特性

 

参数

技术指标

平均粒径

90±15μm

基质

高交联琼脂糖

功能基

纳米抗体

血清型

AAV II

动态载量

>10 13  VG / mL

流速

保留时间 > 3 min

最大耐压

0.3 MPa

pH 范围

1-11

离子强度范围

0-5 M Na Cl

缓冲液相容性

可耐受所有常规试剂 ,包括乙二醇、4M 尿素、2-3M 盐酸胍

溶剂相容性

水、0-20%乙醇、 1-2M 有机酸(乙酸、磷酸、甘氨酸 等)。

避免使用强氧化剂和还原剂、丙酮、苯甲醇。

使用温度

4-30 ℃

保存

2~10 ℃(20%乙醇 避免冷冻

 

 

3、 应用

      AAV  亲和层析介质(II 型) 用于腺相关病毒(AAVII)的快速、 高效纯化。 其层 析操作通常包括平衡、上样、淋洗、洗脱、清洗等步骤。

具体的操作方法如下:

平衡: 5~10CV  的平衡缓冲液(AAV  在中性  pH  附近与  AAV  亲和层析介质结合 因此常规缓冲液体系(如  PBS、Tris、柠檬酸盐)均可用于AAV的纯化 例如  20 mM PB+0.5M NaCl pH7.4 以不高于上限压力的流速平衡离子交换 ,至流出液电导和  pH 不变(与平衡液一致)。

上样:样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。为了避免堵塞层析 ,样品溶液应经离心或微滤(0.45μm) 处理。 上样量根据介质的载量和样品溶液中 AAV  的含 量计算。

淋洗:上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗 ,直至紫外下降至基线。

洗脱:用洗脱缓冲液(通常通过降低  pH 来洗脱 ,例如在  pH 2  5  的范围  ,如  0.1 M 甘氨酸 + 0.5M NaCl  pH 2.5) 洗脱收集流出液。 由于  AAV  对高 性条件敏感 ,因此收集的洗脱液应立即中和。

洗:AAV 亲和层析介质使用后需要对 AAV 亲和层析介质进行清洗(纳米对碱耐受性不高 ,不建议用  NaOH  溶液清洗 AAV  亲和层析介质 推荐的清步骤如下:

1)  0.1M 柠檬酸  pH 2.0(亦可用 0.1M 甘氨酸 pH 2.0) 清洗介质;

2)  2M 盐酸胍或 2M 尿素清洗介质;

(3) 用中性  pH  缓冲液(如平衡缓冲液  20 mM PB+0.5M NaCl  pH7.4) 新平衡进行下一循环的纯化 ,或储存在 20%乙醇中。

保存:2-10℃ 储存于 20%乙醇中;层析柱中的介质可用 20%的乙醇冲洗后 保存于 2-10℃

其它注意事项:在使用和保存柱子的时候 ,要避免柱子流干或密封不严 ,防止气泡进入。

 

4、 订购信息

   

货号

规格

AAV 亲和层析介质(II 型)

BG19-0010-02

50mL

BG19-0010-04

500mL

BG19-0010-05

1L

BG19-0010-07

10L

BG19-0010-08

20L

 

 

 

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产品照片-AAV亲和层析介质-2型