DEAEHL弱阴离子交换介质

包括以下产品：

HPDEAEHL-30 / HPDEAEHL-60

CPDEAEHL-30 / CPDEAEHL-60 / GPDEAEHL-60（500）

1、产品简介

      离子交换层析（Ion Exchange Chromatography）是根据生物分子表面电荷（种类、数目和分布）特异性实现对生物大分子分离纯化最常用的方法。博进生物开发的高载弱阴离子交换介质以具有刚性结构的聚甲基丙烯酸酯微球作为基质，采用特有的表面修饰技术大幅提高聚合物基质的亲水性，采用博进生物设计的高载量配基提升离子交换基团吸附性能，具有高载量、低非特异性吸附以及优良的生物相容性等优点。充分满足多肽、重组蛋白、核酸、疫苗、抗体及其衍生物、病毒或类病毒颗粒等生物大分子的分离纯化。博进该类型介质具有大通量的特点，尤其适用于粘稠料液。可根据客户应用需求的不同提供不同尺寸与孔径的系列产品，可以满足捕获、中度纯化、精细纯化、分析纯化各环节的应用，为客户提供生物样品从实验室纯化到工业化生产的整体解决方案。

2、产品参数

表1：博进高载弱阴离子小孔HPDEAEHL系列介质参数总览

表2：博进高载弱阴离子大孔CPDEAEHL系列介质参数总览

表3：博进高载弱阴离子超大孔GPDEAEHL系列介质参数总览

3、使用方法 

       博进高载弱阴离子交换介质广泛用于重组蛋白、血液制品、酶、多糖、核酸等的层析分离。层析操作通常包括碱洗消毒、平衡、上样、淋洗、洗脱、再生、原位清洗等步骤。

具体的操作方法如下：

3.1碱洗消毒：

     用0.5 M NaOH低流速冲洗层析柱30 min。

3.2平衡：

   （1）酸性缓冲液：先用高浓度缓冲液（如 500 mM HAc- NaAc, pH5.2）冲10CV，再用纯水平衡约5 CV，最后用低浓度缓冲液（如 20 mM HAc- NaAc, pH5.2,具体的缓冲体系应根据目标蛋白的稳定性和等电点进行筛选和优化）以250-500cm/h平衡离子交换柱4-6 CV，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。

   （2）碱性缓冲液：10-20 CV的平衡缓冲液（Buffer A，如20 mM Tris-HCl，pH8.0，具体的缓冲体系应根据目标蛋白的稳定性和等电点进行筛选和优化）以250-500cm/h平衡离子交换柱，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。

3.3上样：

     样品缓冲液应尽可能与平衡液一致，固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析或添加相应量的盐；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品溶液应经离心或微滤（0.45μm）处理。上样量根据介质的载量和样品溶液中目标蛋白的含量计算。

3.4淋洗：

     上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗，直至紫外下降至基线。

3.5洗脱：

     用洗脱缓冲液（如20 mM Tris-HCl + 1 M NaCl，pH8.0）洗脱，洗脱方式可采用pH梯度洗脱、线性梯度洗脱或阶梯式梯度洗脱，收集流出液。

3.6再生：

     每次层析之后可用1-2 M NaCl清洗层析柱，除去强吸附蛋白。

3.7原位清洗（CIP）：

     柱子使用5-10次（具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对柱子进行原位清洗：

   （1）对于通过离子键强结合的蛋白，可用2 M NaCl清洗3-4CV；

   （2）对沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白、脂蛋白，可用0.5 M NaOH冲洗3-4CV；

   （3）对强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用70%乙醇或30%异丙醇以不高于上限压力的流速冲洗5-10 min（使用高浓度的有机溶剂时，为了避免产生气泡，应采用逐步增加有机溶剂浓度的方法）。

3.8保存：

     2-30℃储存于20%乙醇中；层析柱中的介质可用20%的乙醇冲洗后保存于2-30℃。

3.9其它注意事项：

     在使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干或密封不严，防止气泡进入。

4、订购信息