丁基疏水层析介质

包括以下产品

CPB-30(低密度）/CPB-30(高密度）/CPB-60(低密度）/CPB-60(高密度）

GPB-30（低密度）/GPB-30(高密度）/GPB-60(低密度）/GPB-60(高密度）

1、产品简介

      疏水相互作用层析（Hydrophobic Interaction Chromatography，简称HIC）是一种根据蛋白质表面疏水性的不同，利用蛋白质与疏水相互作用层析介质疏水表面可逆的相互作用来分离蛋白质的方法。疏水相互作用层析。疏水相互作用层析操作条件温和、分辨率高，是生物大分子分离纯化最常用的方法之一。博进公司开发的Butyl疏水相互作用层析介质以高交联度聚丙烯酸酯微球为基质，以丁基（Butyl）为配基，该介质保留了聚合物微球的高机械强度，同时对生物活性大分子具有很好的相容性，特别适用于蛋白质、多肽、多糖、小核酸、质粒等的分离纯化。

2、产品参数

3、使用方法 

      疏水相互作用层析操作通常包括平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。具体的操作方法如下（以7.5 cm ´1.6 cm I.D., CV=15ml为例）：

具体的操作方法如下：

3.1平衡：

     用5~10CV的平衡缓冲液（Buffer A，如50 mM PB+1.0~2.0 M (NH₄)₂SO₄, pH7.0，具体的缓冲体系、盐的种类及浓度应根据目标蛋白的稳定性及疏水性、层析介质的疏水性进行筛选和优化）以60-150cm/h的流速平衡层析柱，至流出液电导和pH与平衡液一致。

3.2上样：

     样品缓冲液应尽可能与平衡液一致，固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析或添加相应量的盐；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品溶液应经离心或微滤（0.45μm）处理。上样量根据介质的载量和样品溶液中目标蛋白的含量计算。

3.3淋洗：

     以60-150cm/h的流速上样，并继续用平衡缓冲液淋洗至基线。

3.4洗脱：

    用洗脱缓冲液（Buffer B，如50 mM PB, pH7.0）洗脱（可采用线性梯度洗脱或阶越梯度洗脱），收集流出液。

3.5再生：

    每次层析之后可用3CV低离子强度的缓冲液以60-150cm/h的流速再生层析柱，除去疏水结合较强（可逆结合）的蛋白，然后依次用3CV的水冲洗，5CV的平衡缓冲液平衡。

3.6原位清洗（CIP）：

     介质使用1-5次（具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进行在位清洗，除去不可逆结合的蛋白和其它物质：

  （1）对沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白和脂蛋白，可用1M NaOH以1-2ml/min的流速反向冲洗3~4CV，CIP时长30-60min，并立即用3CV的水冲洗，5CV的平衡缓冲液平衡；

  （2）对强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用70%乙醇或30%异丙醇反向冲洗3~4CV（使用高浓度的有机溶剂时，为了避免产生气泡，应采用逐步增加有机溶剂浓度的方法），CIP时长30-60min，并立即用3CV的水冲洗，5CV的平衡缓冲液平衡。 

3.7保存：

     2-30℃储存于20%乙醇中；层析柱中的介质可用20%的乙醇冲洗后保存于2-30℃。

3.8其它注意事项：

     在使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干或密封不严，防止气泡进入。

4、订购信息