MMC复合弱阳离子交换介质
包括以下产品
HPMMC-60 / GPMMC-60
1、产品简介
博进生物开发的MMC复合弱阳离子交换介质采用具有刚性结构的聚甲基丙烯酸酯微球作为基质,通过特有的表面修饰技术使得基球带有疏水基团的同时带有弱阳离子交换基团。相比传统弱阳离子交换介质,复合模式弱阳离子介质在较高盐浓度下仍然具备较好的吸附性能,纯化蛋白的过程中可以免去高盐样品的脱盐步骤。
2、产品参数
技术指标/型号 |
HPMMC-60 |
GPMMC-60 |
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平均粒径 |
70±20μm |
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孔径 |
30 nm |
500 nm |
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基质 |
聚甲基丙烯酸酯 |
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功能基 |
苯基(-C6H5)、羧基(-COO-) |
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功能基类型 |
复合弱阳离子 |
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动态载量* (mg 溶菌酶 /ml wet resin gel) |
0 mM NaCl |
100mM NaCl |
500 mM NaCl |
0 mM NaCl |
100mM NaCl |
500 mM NaCl |
≥40 |
≥35 |
≥35 |
≥20 |
≥17 |
≥15 |
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最大耐压 |
1 MPa |
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pH稳定性 |
pH 3-13 |
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保存 |
2~30 ℃(20%乙醇) |
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*在一定盐浓度条件下用溶菌酶作为模型蛋白对动态载量进行测定 |
3、使用方法
MMC复合弱阳离子交换介质专为病毒、疫苗等超大生物分子的纯化而设计。其层析操作通常包括平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。
具体的操作方法如下:
3.1平衡:
用5~10CV的平衡缓冲液(Buffer A,如20 mM PB + 100mM NaCl,pH7.0,具体的缓冲体系以及NaCl浓度应根据目标蛋白的稳定性和等电点进行筛选和优化)以不高于上限压力的流速平衡离子交换柱,至流出液电导和pH不变(与平衡液一致)。
3.2上样:
样品缓冲液应尽可能与平衡液一致,固体样品可用平衡液溶解配制;低浓度样品溶液可用平衡液透析或添加相应量的盐;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱,样品溶液应经离心或微滤(0.45μm)处理。上样量根据介质的载量和样品溶液中目标蛋白的含量计算。
3.3淋洗:
上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗,直至紫外下降至基线。
3.4洗脱:
用洗脱缓冲液(如20 mM PB+1M NaCl,pH7.0)洗脱,洗脱方式可采用pH梯度洗脱、线性梯度洗脱或阶梯式梯度洗脱,收集流出液。
3.5再生:
每次层析之后可用1-2M NaCl清洗层析柱,除去强结合的蛋白。
3.6原位清洗:
介质使用5-10次(具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关)后,需要对介质进行原位清洗:
(1)对于通过离子键强结合的蛋白,可用2M NaCl清洗3~4CV;
(2)对沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白、脂蛋白,可用1M NaOH冲洗3~4CV;
(3)对强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质,可用70%乙醇或30%异丙醇以不高于上限压力的流速冲洗3~4CV(使用高浓度的有机溶剂时,为了避免产生气泡,应采用逐步增加有机溶剂浓度的方法)。
3.7保存:
2-30℃储存于20%乙醇中;层析柱中的介质可用20%的乙醇冲洗后保存于2-30℃。
3.8其它注意事项:
在使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干或密封不严,防止气泡进入。
4、订购信息
产品名称 |
货号 |
规格 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
HPMMC-60 复合弱阳离子交换介质 |
BG66-1110-02 |
50ml |
GPMMC-60 复合弱阳离子交换介质 |
BG66-3110-02 |
50ml |
BG66-1110-04 |
500ml |
BG66-3110-04 |
500ml |
||
BG66-1110-05 |
1L |
BG66-3110-05 |
1L |
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BG66-1110-07 |
10L |
BG66-3110-07 |
10L |
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BG66-1110-08 |
20L |
BG66-3110-08 |
20L |