BG MMC FF复合弱阳离子交换介质

1、产品简介

      BG MMC FF复合弱阳离子交换介质以高流速琼脂糖为基质，是一种多模式层析介质，同时具有阳离子交换、疏水和氢键作用力，疏水基团的引入使其对盐有一定的耐受性，纯化过程中可以免去高盐样品的脱盐步骤。

2、产品参数

3、使用方法 

      BG MMC FF复合弱阳离子交换介质专为病毒、疫苗等超大生物分子的纯化而设计。其层析操作通常包括平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。

具体的操作方法如下：

3.1平衡：

     用5~10CV的平衡缓冲液（Buffer A，如20 mM PB + 100mM NaCl，pH7.0，具体的缓冲体系以及NaCl浓度应根据目标蛋白的稳定性和等电点进行筛选和优化）以不高于上限压力的流速平衡离子交换柱，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。

3.2上样：

     样品缓冲液应尽可能与平衡液一致，固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析或添加相应量的盐；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品溶液应经离心或微滤（0.45μm）处理。上样量根据介质的载量和样品溶液中目标蛋白的含量计算。

3.3淋洗：

    上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗，直至紫外下降至基线。

3.4洗脱：

    用洗脱缓冲液（如20 mM PB+1M NaCl，pH7.0）洗脱，洗脱方式可采用pH梯度洗脱、线性梯度洗脱或阶梯式梯度洗脱，收集流出液。

3.5再生：

    每次层析之后可用1-2M NaCl清洗层析柱，除去强结合的蛋白。

3.6原位清洗：

     介质使用5-10次（具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进行原位清洗：

   （1）对于通过离子键强结合的蛋白，可用2M NaCl清洗3~4CV；

   （2）对沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白、脂蛋白，可用1M NaOH冲洗3~4CV；

   （3）对强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用70%乙醇或30%异丙醇以不高于上限压力的流速冲洗3~4CV（使用高浓度的有机溶剂时，为了避免产生气泡，应采用逐步增加有机溶剂浓度的方法）。

3.7保存：

     2-30℃储存于20%乙醇中；层析柱中的介质可用20%的乙醇冲洗后保存于2-30℃。

3.8其它注意事项：

     在使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干或密封不严，防止气泡进入。

4、订购信息