BG Adhere FF复合强阴离子 交换介质
1、产品简介
BG Adhere FF复合强阴离子交换介质以高流速琼脂糖为基质,是一种多模式层析介质,同时具有阴离子交换、疏水和氢键作用力,专门针对单抗中度/精细纯化。它具有高流速、高载量及良好的化学稳定性和物理性能,可以缩短生产周期,提高生产效率,一步去除蛋白A、聚体、宿主蛋白、核酸和病毒。
2、产品参数
技术指标/型号 |
BG Adhere FF复合强阴离子交换介质 |
平均粒径 |
90μm±15μm |
基质 |
高流速琼脂糖 |
功能基 |
复合季胺基 |
功能基类型 |
复合强阴离子 |
动态载量 |
在0.1M NaCl条件下,载量≥35 mg BSA /ml wet resin gel |
最大耐压 |
0.3 MPa |
pH稳定性 |
pH 3-13 |
保存 |
2~30 ℃(20%乙醇) |
3、使用方法
Adhere复合阴离子交换介质适用于单抗中度/精细纯化,可以去除蛋白A、聚体、宿主蛋白、核酸和病毒。其层析操作通常包括平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。
具体的操作方法如下:
3.1平衡:
用5~10CV的平衡缓冲液(如20 mM PB + 0.1 M NaCl,pH7.0,具体的缓冲体系应根据目标蛋白的稳定性和等电点进行筛选和优化)以不高于上限压力的流速平衡层析柱,至流出液电导和pH不变(与平衡液一致)。
3.2上样:
样品缓冲液应尽可能与平衡液一致,固体样品可用平衡液溶解配制;低浓度样品溶液可用平衡液透析或添加相应量的盐;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱,样品溶液应经离心或微滤(0.45μm)处理。上样量根据介质的载量和样品溶液中目标蛋白的含量计算。
3.3淋洗:
上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗,直至紫外下降至基线。
3.4洗脱:
用洗脱缓冲液(如20 mM PB+1M NaCl,pH7.0)洗脱,洗脱方式可采用pH梯度洗脱、线性梯度洗脱或阶梯式梯度洗脱,收集流出液。
3.5再生:
每次层析之后可用1-2M NaCl清洗层析柱,除去强结合的蛋白。
3.6 原位清洗:
介质使用5-10次(具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关)后,需要对介质进行原位清洗:
(1)对于通过离子键强结合的蛋白,可用2M NaCl清洗3~4CV;
(2)对沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白、脂蛋白,可用1M NaOH冲洗3~4CV;
(3)对强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质,可用70%乙醇或30%异丙醇以不高于上限压力的流速冲洗3~4CV(使用高浓度的有机溶剂时,为了避免产生气泡,应采用逐步增加有机溶剂浓度的方法)。
3.7 保存:
2-30℃储存于20%乙醇中;层析柱中的介质可用20%的乙醇冲洗后保存于2-30℃。
3.8 其它注意事项:
在使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干或密封不严,防止气泡进入。
4、订购信息
产品名称 |
货号 |
规格 |
BG Adhere FF复合强阴离子交换介质 |
BG67-0010-02 |
50ml |
BG67-0010-04 |
500ml |
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BG67-0010-05 |
1L |
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BG67-0010-07 |
10L |
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BG67-0010-08 |
20L |